Virus de la influenza A

El virus de la influenza A es un virión que tiene una forma esférica y un diámetro de 80-120 nm, su peso molecular es de 250 MD. El genoma del virus está representado por una cadena única fragmentada (8 fragmentos) de ARN negativo con una masa total de 5 MD. El tipo de simetría de la nucleocápside es espiral. El virus de la influenza tiene una supercapside (membrana) que contiene dos glicoproteínas: hemaglutinina y neuraminidasa, que sobresalen por encima de la membrana en forma de varias espinas. La hemaglutinina tiene una estructura de trímero con una masa de 225 kD; m de cada monómero de 75 kD. El monómero consiste en una subunidad más pequeña con una masa de 25 kD (HA2) y una subunidad más grande con una masa de 50 kD (HA1).

Las principales funciones de la hemaglutinina:

• reconoce el receptor celular - mukopeptide, que tiene N-acetylneuram-un nuevo ácido (siálico);
• asegura la fusión de la membrana del virión con la membrana de la célula y las membranas de sus lisosomas, es decir, es responsable de la penetración del virión en la célula;
• determina la naturaleza pandémica del virus (cambio de hemaglutinina, la causa de pandemias, su variabilidad, epidemias de influenza);
• tiene las mayores propiedades protectoras, responsables de la formación de inmunidad.

En virus de influenza A humanos, humanos y de mamíferos, se detectaron 13 tipos de hemaglutinina que diferencian antígenos, a los que se les asignó la numeración de extremo a extremo (dH1dHlO3).

La neuraminidasa (N) es un tetrámero con una masa de 200-250 kD, cada monómero tiene una masa de 50-60 kD. Sus funciones son:

• asegurar la diseminación de los viriones por escisión del ácido neuramínico de los viriones recién sintetizados y la membrana celular;
• junto con la determinación de hemaglutinina de las propiedades pandémicas y epidémicas del virus.

El virus de la influenza A detectó 10 variantes diferentes de neuraminidasa (N1-N10).

Fragmentos Virion nucleocápside consta de 8 proteínas de ARNv y de la cápside, formando un cordón en espiral. En Z 'extremos de los 8 fragmentos de ARNv tienen secuencia idéntica de 12 nucleótidos. Los extremos 5 'de cada fragmento también tienen la misma secuencia de 13 nucleótidos. Los extremos 5 'y 3' son parcialmente complementarios entre sí. Esta circunstancia, obviamente, permite regular la transcripción y la replicación de fragmentos. Cada uno de los fragmentos se transcribe y replica de forma independiente. Con cada uno de ellos firmemente atadas cuatro proteínas de la cápside: nucleoproteína (NP), lleva a cabo papel estructural y normativo; proteína PB1 - transcriptasa; PB2 - endonucleasa y RA - replicasa. Las proteínas PB1 y PB2 tienen propiedades básicas (alcalinas) y RA - ácido. Las proteínas PB1, PB2 y PA forman un polímero. La nucleocápside está rodeada por una proteína de la matriz (proteína M1), que desempeña un papel principal en la morfogénesis del virión y protege el ARN del virión. Proteínas M2 (codifica uno de los marcos de lectura séptimo fragmento), NS1 y NS2 (ARNv codificados octavo fragmento que tiene, como el séptimo fragmento ARNv dos marcos de lectura) se sintetizan en el curso de la replicación viral, pero su estructura no está incluido.

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El ciclo de vida del virus de la influenza A

El virus de la influenza se absorbe en la membrana celular debido a la interacción de su hemaglutinina con el mucopeptide. Luego el virus ingresa a la célula usando uno de dos mecanismos:

• fusión de la membrana del virión con la membrana celular o
• a lo largo del camino bordeado de fóvea - vesícula bordeada - endosoma - lisosoma - fusión de la membrana del virión con la membrana del lisosoma - el rendimiento de la nucleocápside en el citosol de la célula.

La segunda etapa de "pelar" el virión (destrucción de la proteína de la matriz) ocurre en el camino hacia el núcleo. La peculiaridad del ciclo de vida del virus de la gripe radica en el hecho de que la transcripción de su ARNv requiere siembra. El hecho de que el virus no puede sintetizar en sí "cap", o la tapa (Inglés cap.) - un sitio especial en el extremo 5 'del ARNm, que consta de guanina metilado y de 10 a 13 nucleótidos contiguos, que es necesario reconocer el ribosoma de ARNm. Por lo tanto, a través de sus picaduras de proteínas PB2 tapa de ARNm celular, así como la síntesis de ARNm en las células se produce sólo en el núcleo, el ARN viral necesariamente debe penetrar primero en el núcleo. Penetra en él en forma de una ribonucleoproteína que consta de 8 fragmentos de ARN unidos a las proteínas NP, PB1, PB2 y PA. Ahora la vida de la célula está completamente sujeta a los intereses del virus, sus reproducciones.

Característica de la transcripción

En el núcleo del ARNv se sintetizan tres tipos de ARN específicos de virus: 1) ARNs complementarios positivos (ARNm) utilizados como matrices para la síntesis de proteínas virales; contienen en el extremo 5 'un tapón escindido del extremo 5' del ARNm celular, y en el extremo 3 ', una secuencia poli-A; 2) ARN complementario de longitud completa (ARNc), que sirve como plantilla para la síntesis de ARN de virión (ARNv); en el extremo 5 'del ARNc el tapón está ausente, no hay secuencia de poli-A en el extremo 3'; 3) ARN de virión negativo (ARNv), que es un genoma para viriones recién sintetizados.

Inmediatamente, incluso antes de que se complete la síntesis, vRNA y cRNA entran en asociación con las proteínas de la cápside, que ingresan al núcleo desde el citosol. Sin embargo, solo las ribonucleoproteínas asociadas con vRNA se incluyen en los viriones. Las ribonucleoproteínas que contienen ARNc no solo no entran en la composición de los viriones, sino que ni siquiera salen del núcleo de la célula. Los ARNm virales entran al citosol, donde se traducen. Las moléculas de ARNv recién sintetizadas, después de la asociación con las proteínas de la cápside, migran del núcleo al citosol.

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Características de la traducción de proteínas virales

Las proteínas NP, PB1, PB2, RA y M se sintetizan en polirribosomas libres. Las proteínas NP, PB1, PB2 y PA síntesis después de volver desde el citosol al núcleo, donde se unen a recién sintetizados ARNv y, a continuación, devuelven como la nucleocápside en el citosol. La proteína de la matriz después de la síntesis se mueve a la superficie interna de la membrana celular, desplazando de esta área a las proteínas celulares. Proteínas H y N se sintetizan en los ribosomas asociados con las membranas del retículo endoplásmico, que se transportan sobre el mismo, sometidos a la glicosilación, y montados en la superficie exterior de la membrana celular, formando picos justo enfrente de la proteína M, que se encuentra en su superficie interna. La proteína H se procesa durante el procesamiento cortando en HA1 y HA2.

La etapa final de la morfogénesis del virión está controlada por la proteína M. La nucleocápside interactúa con ella; pasa a través de la membrana celular, se cubre con primera proteína M, y la capa de lípidos entonces celular y glicoproteínas superkapsidnymi H y N. El ciclo de vida del virus tarda 6-8 horas y es ciernes completa de virión recién sintetizado, que son capaces de atacar las células de otros tejidos.

La estabilidad del virus en el entorno externo es baja. Se destruye fácilmente por calentamiento (a 56 ° C durante 5-10 minutos), bajo la influencia de la luz solar y la luz ultravioleta, y se neutraliza fácilmente con desinfectantes.

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Patogénesis y síntomas de la gripe A

El período de incubación para la influenza es corto - 1-2 días. El virus se multiplica en las células epiteliales de la membrana mucosa del tracto respiratorio con la localización predominante en la tráquea, que clínicamente se manifiesta como una tos seca y dolorosa con dolor a lo largo de la tráquea. Los productos de degradación de las células afectadas ingresan al torrente sanguíneo, causan intoxicación grave y aumentan la temperatura corporal a 38-39ºC. El aumento de la permeabilidad vascular, causado por el daño a las células endoteliales, puede causar cambios patológicos en varios órganos: hemorragias puntuales en la tráquea, los bronquios y, en ocasiones, edema cerebral con un desenlace fatal. El virus de la influenza tiene un efecto deprimente sobre la sangre y el sistema inmunitario. Todo esto puede conducir a infecciones secundarias virales y bacterianas, que complican el curso de la enfermedad.

Inmunidad postinfecciosa

La idea anterior de que después de sufrir la gripe sigue siendo débil y de corta duración de inmunidad después de regresar del virus H1N1 refutada en 1977. El virus causó la enfermedad, principalmente en personas menores de 20 años de edad, que es. E. Los que no están enfermos antes, hasta 1957. En consecuencia, la inmunidad postinfecciosa es bastante intensa y prolongada, pero tiene un carácter específico de tipo pronunciado.

El papel principal en la formación de la inmunidad adquirida pertenece a los anticuerpos neutralizantes del virus que bloquean la hemaglutinina y la neuraminidasa, así como a las inmunoglobulinas secretoras de IgA.

Epidemiología de la gripe A

La fuente de infección es una persona, un enfermo o un transportista, raramente animales (domésticos y salvajes, cerdos). La infección de las personas ocurre por gotitas aerotransportadas, el período de incubación es muy corto (1-2 días), por lo que la epidemia se propaga muy rápidamente y puede convertirse en una pandemia en ausencia de inmunidad colectiva. La inmunidad es el principal regulador de las epidemias de influenza. A medida que la inmunidad colectiva se acumula, la epidemia está disminuyendo. Al mismo tiempo, debido a la formación de inmunidad, se seleccionan cepas del virus con una estructura antigénica modificada, principalmente hemaglutinina y neuraminidasa; estos virus continúan causando brotes hasta que los anticuerpos se les aparecen. Tal deriva antigénica y mantiene la continuidad de la epidemia. Sin embargo, en el virus de la influenza A, se ha descubierto otra forma de variabilidad, llamada cambio o cizalla. Se asocia con un cambio completo de un tipo de hemaglutinina (con menos frecuencia y neuraminidasa) a otro.

Todas las pandemias de influenza fueron causadas por virus de influenza A que sufrieron schiltosis. Pandemia de 1918 fue causada por el virus H1N1 fenotipo (matado a cerca de 20 millones de personas) en la pandemia de 1957 - el virus H3N2 (enfermo con más de la mitad de la población mundial), 1968 - virus H3N2.

Para explicar las razones del fuerte cambio en los tipos de virus de influenza A, se han propuesto dos hipótesis principales. Según la hipótesis de A. A. Smorodintsev, el virus que ha agotado sus posibilidades epidémicas no desaparece, pero continúa circulando en el equipo sin brotes visibles o persistentemente persiste en el cuerpo humano durante mucho tiempo. En 10-20 años, cuando habrá una nueva generación de personas que no tengan inmunidad contra este virus, se convertirá en la causa de nuevas epidemias. Esta hipótesis está respaldada por el hecho de que el virus de influenza A con el fenotipo H1N1, que desapareció en 1957 cuando fue reemplazado por el virus h3N2, reapareció después de una ausencia de 20 años en 1977.

Según otra hipótesis, desarrollado y apoyado por muchos autores, nuevos tipos de virus de influenza A son debido a la re-asociación de genomas entre los virus de la gripe humana y aviar entre el virus de la gripe aviar entre los virus de influenza de aves y mamíferos (cerdos), ayudados por la estructura segmentaria del genoma viral (8 piezas )

Por lo tanto, el virus de la influenza A tiene dos formas de cambiar el genoma.

Mutaciones puntuales que causan deriva antigénica. En primer lugar, los genes de hemaglutinina y neuraminidasa, especialmente en el virus H3N2, son susceptibles a ellos. Gracias a esto, el virus H3N2 causó 8 epidemias durante el período de 1982 a 1998 y sigue siendo una epidemia hasta ahora.

Reasociación de genes entre virus de influenza humana y virus de influenza aviar y porcina. Se cree que la reasociación de los genomas de los virus de influenza A con los genomas del virus de la gripe aviar y porcina es la razón principal del surgimiento de variantes pandémicas de este virus. La deriva antigénica permite que el virus supere la inmunidad existente en los humanos. El cambio antigénico crea una nueva situación epidémica: la mayoría de las personas no tiene inmunidad frente al nuevo virus y se produce una pandemia de gripe. La posibilidad de tal reasociación de los genomas de los virus de influenza A ha sido probada experimentalmente.

Se ha establecido que las epidemias de influenza en humanos son causadas por virus tipo A de solo 3 o 4 fenotipos: H1N1 (H0N1); h3N2; H3N2.

Sin embargo, un virus de pollo (aviar) también es una amenaza significativa para los humanos. Los brotes de gripe aviar han observado en varias ocasiones, en particular, el virus H5N1 de pollo ha causado una epizootia entre los millones de aves domésticas y silvestres de 80 a 90% de mortalidad. La gente se infectó de pollos; entonces en 1997 de gallinas 18 personas se infectaron, un tercio de ellas murió. Se observó un brote particularmente grande en enero-marzo de 2004. Afectó a casi todos los países del sudeste de Asia y a uno de los estados de los EE. UU. Y causó un enorme daño económico. 22 pollos fueron infectados y asesinados. Estricta cuarentena, eliminación de toda la población de aves en todos los centros, la hospitalización y el aislamiento de los pacientes y de todas las personas con fiebre, así como las personas que estaban en contacto con los pacientes, la prohibición de la importación de carne de aves de corral de los siguientes: para la eliminación del foco se tomaron las medidas más severas y decisivas sobre los países, estricta supervisión médica y veterinaria de todos los pasajeros y vehículos que llegan desde estos países. Amplia propagación de la gripe entre los seres humanos no ha ocurrido porque no había re-asociación del genoma con el virus de la gripe aviar con el genoma del virus de la influenza humana. Sin embargo, el peligro de tal reasociación sigue siendo real. Esto puede conducir a la aparición de un nuevo virus de influenza humana pandémico peligroso.

En el nombre de cepas de virus de influenza detectados indicar serotipo del virus (A, B, C), el propietario de la forma (si no es una persona), lugar de aislamiento, número de cepa, año de su lanzamiento (los 2 últimos dígitos) y el fenotipo (entre paréntesis). Por ejemplo: "A / Singapur / 1/57 (h3N2), A / Pato / USSR / 695/76 (H3N2)".

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Diagnóstico de laboratorio de influenza A

El material utilizado para el estudio es una nasofaringe desmontable, que se obtiene mediante enrojecimiento, o usando tampones de algodón y sangre. Los métodos de diagnóstico aplican lo siguiente:

• Virológico - infección de embriones de pollo, cultivos de células renales de monos verdes (Vero) y perros (MDSK). Los cultivos celulares son particularmente efectivos para el aislamiento de los virus A (H3N2) y B.
• Serológico - la detección de anticuerpos específicos y el aumento de su título (en sueros pareados) con la ayuda de RTGA, RSK, método de inmunoensayo.
• Como un diagnóstico acelerado, se utiliza el método de inmunofluorescencia, que permite detectar rápidamente el antígeno viral en los frotis de la mucosa nasal o en los lavados de la nasofaringe de los pacientes.
• Para detectar e identificar el virus (antígenos virales) sugirió métodos de sonda de ARN y PCR.

Tratamiento de la gripe A

Tratamiento de la gripe A, que debe iniciarse tan pronto como sea posible, así como la prevención de la gripe y otras IRA viral se basa en el uso de dibazola, interferón y sus inductores amiksina y Arbidol en regímenes especiales, y para el tratamiento y la prevención de la gripe en niños mayores de 1 año - Alguire (rimantadina ) por esquemas especiales.

Prevención específica de la gripe A

Cada año en el mundo, cientos de millones de personas sufren de gripe, lo que causa un enorme daño a la salud de la población y la economía de cada país. El único medio confiable para combatirlo es la creación de inmunidad colectiva. Para este propósito, se proponen y utilizan los siguientes tipos de vacunas:

1. vivir de un virus atenuado;
2. asesinado todo el virión;
3. Vacuna de Subvirion (de viriones divididos);
4. subunidad-vacuna, que contiene solo hemaglutinina y neuraminidasa.

En nuestro país ha implantado y aplica una vacuna de subunidades de polímero-trivalente ( "Grippol"), en la que el conjugado es proteínas de superficie estéril virus A y B se asocia con una polioksidoniem copolímero (inmunoestimulante).

Niños a partir de 6 meses. Hasta 12 años, de acuerdo con las recomendaciones de la OMS, se debe vacunar solo a la vacuna de subunidades como la menos reactogénica y tóxica.

El principal problema para aumentar la efectividad de las vacunas contra la gripe es garantizar su especificidad frente al virus real, es decir, la versión del virus que causó la epidemia. En otras palabras, la vacuna debe contener antígenos específicos del virus real. La principal forma de mejorar la calidad de la vacuna es utilizar las variantes antigénicas más comunes y conservadas de los epítopos del virus A que tienen la inmunogenicidad máxima.